磺胺类(Sulfonamides, SAs)为化学合成的广谱抗菌药,对畜禽疾病控制和治疗起到重要作用。但由于磺胺类药物存在严重的不良反应,且有潜在的致癌性。欧盟、美国及我国等国家均制定了磺胺类药物在动物源食品中的最大残留限量(MRL)。我国农业部第235号公告规定磺胺类药物在动物可食性组织中的MRL为100μg/kg。磺胺类检测试纸卡是应用胶体金免疫层析技术研发的新一代兽药残留检测产品,操作简便,结果容易观察,不需要任何设备;整个操作时间仅需5-10分钟,能最大限度地减少工作强度。适用于牛奶、畜禽肌肉、肝脏、尿样、鱼肉、虾肉、鸡蛋和蜂蜜等组织中磺胺类药物的快速筛选。
【测定原理】
磺胺类检测试纸卡采用胶体金免疫层析方法,在NC膜上预包被偶联抗原和羊抗鼠IgG抗体,样本中残留的磺胺类药物和NC膜上预包被的偶联抗原竞争磺胺抗体,抑制抗原和磺胺类抗体的结合。从而通过对检测线和质控线的观察就可以判断样品中磺胺类药物是否超过检测限。
【试剂盒的技术参数】
药 物 |
交叉反应率(%) |
检测限*(μ/kg) |
磺胺二甲嘧啶 Sulfadimidine100 |
100 |
35 |
磺胺对甲氧嘧啶Sulfamethoxydiazine |
764 |
28 |
磺胺邻二甲氧嘧啶 Sulfadoxine |
1117 |
22 |
磺胺嘧啶 Sulfadiazine |
631 |
36 |
磺胺间甲氧嘧啶 Sulfamonomethoxine |
558 |
30 |
磺胺甲基嘧啶 Sulfamerazine |
415 |
30 |
磺胺喹噁啉 Sulfaquinoxalin |
360 |
40 |
磺胺二甲基异嘧啶 Sulfisomidine |
310 |
30 |
磺胺噻唑 Sulfathiazole |
182 |
40 |
磺胺氯吡嗪 Sulfachlorpyrazine |
178 |
50 |
磺胺地索辛 Sulfadimethoxine |
109 |
40 |
磺胺氯哒嗪 Sulfachorpyridazine |
79 |
40 |
磺胺甲氧哒嗪 Sulfamethoxypyridazine |
78 |
40 |
磺胺甲恶唑 Sulfamethoxazole |
23 |
<100 |
磺胺甲噻二唑 Sulfamethizole |
15 |
<100 |
磺胺异恶唑 Sulfisoxazole |
111 |
<100 |
氨苯磺胺 Sulfaniamide |
<10 |
<100 |
磺胺脒 Sulfaguanidine |
<10 |
<100 |
【试剂盒提供的材料】
磺胺类检测试纸卡...........................................................40份
说明书.............................................................................. 1份
滴管....................................................................................40份
【使用单位需自备的仪器设备与试剂】
仪器设备:均质器;离心机;漩涡仪;分析天平(感量0.01 g)。
器材:刻度移液管:10 mL;聚苯乙烯离心管:1.5mL;微量移液器:1mL。
【奶样收集】
奶粉
1、用天平称取2g奶粉到锥形瓶中,再加入50℃左右去离子水到10ml(还原牛奶)。
2、用力震荡3min,使充分溶解。
3、取牛奶2ml样品,用冷冻离心机(4000RPM ,10℃)离心10min去除脂肪
(如没有冷冻离心机,可将样品先冷却到10℃,再离心)。
4、离心后用移液器彻底去除上层奶油。
5、取下层脱脂牛奶与纯净水1:4稀释用于检测。
牛奶
(1)取1 mL新鲜的牛奶(含脂牛奶)样本置于2ml离心管中,降温至10℃以下4000 r/min离心10分钟后,弃去上层脂肪(约四分之三),剩余四分之一奶样与纯净水1:6(1份奶样+5份纯净水)互溶,互溶后刻度刚好为总体积1.5ml。用力震荡1min,使充分溶解后为备用待检液;
(2)脱脂牛奶待检液配法,脱脂牛奶与纯净水1:4(1份脱脂牛奶+3份纯净水)互溶,用力震荡1min,使充分溶解后为脱脂牛奶备用待检液;
【检测步骤】
检测前请仔细阅读使用说明书,检测应在室温下进行。检测步骤为:
(1)将铝箔袋沿切口部位撕开,取出检测卡放于平整的台面上,并做好标记;
(2)用吸管吸取待检样品溶液,垂直加入2~3滴于加样孔中(注:样本中不要带入气泡),反应5-10min判断结果,超过30分钟判读无效。
阴性:C线显色,T线显色,判为阴性,表示样品中磺胺类药物浓度低于检测限。
阳性:C线显色,T线不显色,判为阳性,表示样品中磺胺类药物浓度高于检测限。
无效:C线不显色,无论T线是否显色,该检测卡均判为无效。未出现C线,表明操作过程不正确或检测卡已变质失效。在此情况下,应再次仔细阅读说明书,并用新的检测卡重新测试。
【注意事项】
(1)打开小包装后,请在1小时内尽快使用,使用前注意恢复至室温。
(2)检测卡避免阳光直射。
(3)尽量不要触摸试纸片中央白色膜面。
【储存及有效期】
磺胺类检测试纸卡保存于干燥阴凉处(2~30℃),有效期为18个月,生产日期见外包装盒。