本发明涉及一种抗氧化肽的制备方法,目的在于提供一种原料来源广泛、成本低、抗氧化活性高的南瓜籽抗氧化肽的制备方法,(1)南瓜籽分离蛋白溶液制备:以脱脂南瓜籽粉为原料,利用碱溶酸沉法得到南瓜籽分离蛋白,然后加水配制成南瓜籽分离蛋白溶液;(2)酶解:将南瓜籽分离蛋白溶液在沸水浴中加热使蛋白变性,冷却后调节pH到2.5~3.5,然后加蛋白酶5000~8000U/g,在45~55℃水浴中水解2~6h;(3)灭酶离心后的酶解液通过超滤富集活性肽,最后经浓缩和冷冻干燥,得到南瓜籽抗氧化肽。所得抗氧化肽具有显著的还原能力,较强的清除自由基的能力,应用广泛,具有显著的社会效益和经济效益;酶解工艺条件最优,提高原料的利用率;原料来源广泛,实现了废物利用的目的。种南瓜籽抗氧化肽的制备方法,其特征是包括以下步骤:(1)南瓜籽分离蛋白溶液的制备:以脱脂南瓜籽粉为原料,利用碱溶酸沉法得到南瓜籽分离蛋白,然后加水配制成质量浓度为4~8%的南瓜籽分离蛋白溶液,搅拌均匀;(2)酶解:将步骤(1)得到的南瓜籽分离蛋白溶液在沸水浴中加热5~15分钟使蛋白变性,冷却后调节pH到2.5~3.5,然后加蛋白酶5000~8000U/g,在45~55?℃水浴中水解2~6h,水解过程中保持pH恒定;(3)灭酶离心后的酶解液通过超滤富集活性肽,最后经浓缩和冷冻干燥,得到南瓜籽抗氧化肽。