老鼠主要在夜间活动，黄昏和清晨最为活跃，白天较差。不冬眠，春、秋两季较活动。随自然条件和食物来源而迁移。放水或大雨后田中积水时，向田埂集中。多雨季节，向地势较高处转移。夏季天气炎热，作物生长茂盛，隐蔽条件良好，且这时谷物尚未成熟，，田中食源少，又非主要繁殖季节，故多不挖洞筑巢，随食源而流动。入秋后，天气转寒，又值繁殖高峰季节，多筑巢以避寒和产仔，这时田埂、堤坝上的鼠洞明显增多。入冬后，田野食源缺少，加以洞中不存粮或存粮很少，故有的鼠迁至附近的晒场和草垛中，少数进入住室。开春转暖后，又返回田野。在水利工地，如未做好灭鼠、防鼠工作，鼠可进入工棚。据在安徽某些湖洼地区调查，黑线姬鼠的数量受降雨量和河水水位高低的影响，降雨量大，水位高时，鼠数量少，反之则多。

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