染色质免yi沉淀ChIP技术原理

先用jia醛交联细胞内“蛋白-DNA”复合物，并用超声波破碎DNA至适合的长度。细胞裂解后，孵育结合了抗体的珠子，诱饵蛋白通过其抗体便结合到了Beads上，同时和诱饵蛋白互作的DNA，也一起沉淀到Beads上。洗涤掉未结合的DNA后，再用洗脱液将DNA-蛋白复合物从Beads洗脱下来，便得到染色质免yi共沉淀产物。DNA-蛋白复合物去交联后，既可qPCR检测已知DNA片段，也可用二代测序与蛋白互作的DNA片段。

当没有合适的诱饵蛋白抗体时，可以通过表达融合了flag标签的诱饵蛋白，利用flag标签做免yi沉淀。即细胞过表达Flag-Bait，经裂解后与anti-Flag珠子孵育，诱饵融合蛋白与Beads结合，与诱饵融合蛋白互作的DNA“共沉淀”到Beads上，再经洗涤、洗脱后做qPCR或NGS测序。

染色质免yi沉淀ChIP实验流程

带标签的染色质免yi共沉淀流程图：


染色质免yi沉淀ChIP技术应用

筛选或验证与诱饵蛋白互作的DNA

染色质免yi沉淀ChIP服务*辉骏优势

1. 近十年服务经验，服务案例众多，客户发文Nature Cell Biology等高质量期刊；

2. 可对围绕DNA结合蛋白开展的整体课题提供全fang位方案建议；

3. 自有分子及细胞生物实验平台，能有效制定并执行蕞优的实验路线；

4. 售后技术支持将一直保持到客户发表文章，确保客户安心进行下游实验及投稿。

染色质免yi沉淀ChIP服务信息

染色质免yi沉淀ChIP 客户文献

1.Zhuang Q. et al: NCoR/SMRT co-repressors cooperate with c-MYC to create an epigenetic barrier to somatic cell reprogramming. Nature Cell Biology.2018，IF=17.728. 【研究内容】：客户通过RNA-seq证明了NCoR/SMRT共抑制子与多能位点结合，IP实验、ChIP-qPCR分析进一步表明，NCoR/SMRT-HDAC3复合物在OSKM重编程中诱导组蛋白去乙酰化的多能位点。ChIP-seq分析发现，NCoR/SMRT中还存在着一个c-MYC结合基序。研究揭示了NCoR/SMRT共抑制子在重编程中的作用，并提出了c-MYC在这一过程中的双重功能。 使用相关技术：染色质免yi共沉淀ChIP、chip qpcr实验

2.Wang R.H. et al: A requirement for breast-cancer-associated gene 1(BRCA1) in the spindle checkpoint. PANS. 2004，IF=9.58. 【研究内容】：研究表明BRCA1缺陷型细胞的有丝分裂受到影响，存在纺锤体检查点缺陷。客户检测和纺锤体检查点密切相关的几个基因，发现BRCA1缺陷型Mad2基因表达水平变化明显，由此推测BRCA1是通过影响Mad2的表达，从而影响有丝分裂的。DNA pulldown及ChIP-qPCR实验证实了BRCA1可以和Mad2启动子结合，进一步研究发现BRCA1确实上调Mad2从而影响有丝分裂。 使用相关技术：chip技术服务、染色质免yi共沉淀ChIP-seq

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