厂商 ：库思择（广州）科技有限公司
地址 ：广东 广州市主营产品 ：试剂盒
联系电话 ：13986293127
商品详情描述
产品参数
分类：其他 级别：其它 含量：50T 产品规格：50T
产品特点
ColProof?细胞和组织 DNA快速提取试剂盒
Col-D0101
试剂盒应用
本试剂盒采用裂解液配方在 10 分钟内完成植物叶片、根、茎、花蕊、种子等的裂解、提取和纯 化。提取对象包括水稻、玉米、小麦、油菜等作物。整个过程无需使用蛋白酶 K 等酶类制剂。提取 DNA 可用于 PCR、qPCR、酶切、分子克隆、Sorthern Blot、文库构建等。 本试剂盒仅供研究使用，不可用于临床、食品、化妆品等领域。
使用方法
1. 样本处理
1.1 从动物组织中提取 DNA
1.1.1 取 20-100mg 样本放入液氮中充分研磨，加入 700μL 裂解液 DC，充分混匀，室温作用 1 分钟。
或取 20-100mg 样本加入 700μL 裂解液 DC，加入 1 颗钢珠，放入组织研磨器中，研磨 1-2 分钟。
备注：不同样本中 DNA 含量差异很大，过多使用样本容易导致堵塞，最终导致 DNA 提取量下降。
1.1.2 55℃孵育 1 分钟。
1.1.3 12,000rpm 离心 1 分钟。取 500μL 上清。
1.1.4 （选做）加入 5μL RNase A（10mg/mL），室温静置 5-10 分钟。
1.1.5 加入 250μL 无水乙醇，充分混匀。按照步骤 2.1-2.7 操作。
1.2 从细胞中提取 DNA
1.2.1 悬浮细胞 1,000rpm 离心 5 分钟，收集细胞沉淀。
或者贴壁细胞经过胰酶消化后 1,000rpm 离心 5 分钟，收集细胞沉淀。
1.2.2 细胞数量<5×10 6个时，加入 500μL 裂解液 DC。细胞数量为 5×10 6~1×10 7个时，加入 700μL 裂
解液 DC。轻轻吹打混匀，55℃孵育 1 分钟。
1.2.3 12,000rpm 离心 1 分钟。
1.2.4 细胞数量<5×10 6个时，取 450μL 上清。细胞数量为 5×10 6~1×10 7个时，取 650μL 上清。
1.2.5（选做）加入 5μL RNase A（10mg/mL），室温静置 5-10 分钟。
1.2.6 加入 0.5 倍体积无水乙醇，充分混匀。按照步骤 2.1-2.7 操作。
2. DNA 纯化
2.1 全部转移到 DNA 吸附柱中，12,000rpm 离心 1 分钟，倒掉收集管中废液。
2.2 向 DNA 吸附柱中加入 500μL 洗涤液 DCW1，12,000rpm 离心 30 秒，倒掉收集管中废液。
2.3 向 DNA 吸附柱中加入 500μL 洗涤液 DCW2，12,000rpm 离心 30 秒，倒掉收集管中废液。
2.4 重复步骤 2.3 一次。
2.5 12,000rpm 离心 2 分钟，倒掉收集管中废液。
2.6 将 DNA 吸附柱放入新无 DNase 和无 RNase 离心管，加入 30-50μL 洗脱液 C，室温放置 1 分钟。
2.7 12,000rpm 离心 2 分钟，得到 DNA 溶液，-80℃保存。
注意事项
1. 经常更换手套，防止 DNA 污染。
2. 使用无 DNase 无 RNase 的吸头和离心管，防止 DNA 降解。
3. 常更换吸头，防止交叉污染。
4. 动作轻柔，防止基因组 DNA 断裂。
5. 为了提高洗脱效率，可提前将洗脱液 C 置于 65℃水浴后再使用。
产品实拍
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