Fluo-3 AM是检测细胞内钙离子浓度最常用的荧光探针之一。分子式为C51H50Cl2N2O23，分子量1129.85。

Fluo-3和Fura-2相比，其优点是：一方面可以被氩离子激光（argon-ion laser） 488nm 的激发光激发，方便于检测；另一方面，Fluo-3 和钙离子结合后荧光变化更明显，即对钙离子浓度变化的检测更加灵敏；同时，Fluo-3 和钙离子的结合能力较弱，这样可以比Fura-2 检测到细胞内更高浓度的钙离子水平；此外，对于细胞内的钙离子的即时变化反应得更加准确，减小了因为和钙离子解离速度慢而导致的荧光变化滞后。 

本Fluo-3 AM （钙离子荧光探针） 是配制于无水DMSO （anhydrous DMSO）中的储存液，浓度为5mM。 

Fluo-3 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3 AM 的荧光非常弱，其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。 

Fluo-3 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞内。Fluo-3可以和钙离子结合，结合钙离子后可以产生较强的荧光，最大激发波长为506nm，最大发射波长为526nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右，发射波长为525-530nm。 

用于细胞内钙离子检测时，Fluo-3 AM的常用浓度为0.5-5μM 。通常用含有0.5-5μM 的Fluo-3 AM的适当溶液和细胞一起在20-37℃孵育15-60分钟进行荧光探针装载，随后适当洗涤，洗涤后可以考虑适当再孵育20-30分钟以确保Fluo-3 AM 在细胞内完全转变成Fluo-3。 

注意事项：

Fluo-3 AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。